Investigating the effect of intracameral cefuroxime on oxidative stress and apoptosis in the rat cornea / Investigando o efeito de cefuroxima intracameral sobre o estresse oxidativo e a apoptose na córnea de ratos

ABSTRACT PURPOSE: We examined the effect of intracameral administration of cefuroxime on oxidative stress and endothelial apoptosis in rat corneal tissue. METHODS: In total, 30 rats were divided into 3 groups of 10 rats each (intracameral administration of cefuroxime 0.1 mg/0.01 mL (cefuroxime group); intracameral administration of balanced salt solution 0.01 mL (control group); or absence of intracameral injection (sham group). Corneal endothelial apoptosis was assessed by immunohistochemical analysis using caspase-3 and caspase-8. Total oxidant status, total antioxidant status, oxidative stress index, and paraoxonase and arylesterase levels were examined in corneal endothelial tissue and serum. RESULTS: Paraoxonase levels in the serum were significantly different between the sham and cefuroxime groups (p=0.027). A significant difference was also observed in total oxidant status levels between the cefuroxime and balanced salt solution groups (p=0.023). In addition, there were significant differences in total antioxidant status levels in corneal tissue between the cefuroxime and sham groups (p<0.001) and between the cefuroxime and balanced salt solution groups (p<0.001). Furthermore, significant differences were also observed in oxidative stress index levels between the cefuroxime and balanced salt solution groups (p=0.001) and between the cefuroxime and sham groups (p=0.026). According to the immunohistochemical staining results, a significant association with caspase-3 activity existed between the cefuroxime and balanced salt solution groups (p=0.007), while no significant difference was found with caspase-8 activity (p=0.541). Caspase-3 activity exhibited a significant relationship between the sham and balanced salt solution groups (p=0.018), but no relationship was found with caspase-8 activity (p=0.623). CONCLUSION: Immunohistochemical examination revealed that intracameral cefuroxime increased apoptosis when compared to the sham and balanced salt solution groups. Moreover, intracameral cefuroxime increased oxidative stress in the cornea and simultaneously induced apoptosis.

RESUMO OBJETIVO: Examinamos o efeito da administração intracameral da cefuroxima sobre o estresse oxidativo e a apoptose endotelial no tecido corneano de ratos. MÉTODOS: No total, 30 ratos foram divididos em 3 grupos de 10 ratos cada (administração intracameral de cefuroxima 0,1 mg/0,01 mL (grupo cefuroxima), administração intracameral de solução salina balanceada 0,01 mL (grupo controle) ou ausência de injeção intracameral (grupo sham)). A apoptose endotelial da córnea foi avaliada por análise imuno-histoquimica usando caspase-3 e -8. O status oxidante total, o status antioxidante total, o índice de estresse oxidativo e os níveis de a paraoxonase e arilesterase foram investigados no tecido endotelial da córnea e no soro. RESULTADOS: Os níveis de paraoxonase no soro foram significativamente diferentes entre os grupos sham e cefuroxima (p=0,027). Foi também observada uma diferença significativa nos níveis de estado oxidante total entre os grupos cefuroxima e solução salina balanceada (p=0,023). Além disso, houve diferenças significativas nos níveis de status antioxidante total no tecido da córnea entre os grupos cefuroxima e sham (p<0,001) e entre os grupos cefuroxima e solução salina balanceada (p<0,001). Diferenças significativas também foram observadas nos níveis do índice de estresse oxidativo entre os grupos cefuroxima e solução salina balanceada (p=0,001) e entre os grupos cefuroxima e sham (p=0,026). De acordo com os resultados de coloração imuno-histoquimica, houve associação significativa com a atividade da caspase-3 entre os grupos cefuroxima e solução salina balanceada (p=0,007), enquanto não houve diferença significativa com a atividade da caspase-8 (p=0,541). A atividade da caspase-3 exibiu uma relação significativa entre os grupos sham e solução salina balanceada (p=0,018), mas nenhuma relação foi encontrada com a atividade da caspase-8 (p=0,623). CONCLUSÃO: O exame imuno-histoquímico revelou que a cefuroxima intracameral aumentou a apoptose quando comparada com os grupos sham e solução salina balanceada. Além disso, a cefuroxima intracameral aumentou o estresse oxidativo na córnea e induziu simultaneamente a apoptose.

Evaluation of the safety of intracameral trypan blue injection on corneal tissue using oxidative stress parameters and apoptotic activity: an experimental study / Avaliação da segurança de injeção de azul de tripan intracameral no tecido da córnea utilizando parâmetros de estresse oxidativo e atividade apoptótica: um estudo experimental

Purpose: The present experimental study aimed to investigate the effects of intracameral trypan blue (TB) on oxidative stress parameters and apoptosis in corneal tissue. Methods: Thirty rats were randomly assigned to three groups of 10 rats each: the sham group (Group 1); control group (Group 2); and treatment group (Group 3). The control group was administered 0.01 cc of balanced salt solution. The treatment group was administered 0.006 mg/0.01 cc of TB. The total antioxidant status (TAS) and total oxidant status (TOS) in corneal tissue and blood were measured and the oxidative stress index (OSI) was calculated. Finally, corneal tissue histopathology was evaluated using staining for caspase-3 and -8, and apoptotic activity was examined. Results: The TAS, TOS and OSI levels in the blood samples were not significantly different (p>0.05 for all). Compared with the sham and control groups, the TOS and OSI levels in corneal tissue were significantly different in the treatment group (p<0.05 for all). No significant difference was observed between the sham group and the control group (p>0.05). Immunohistochemical staining for caspase-3 and caspase-8 demonstrated higher apoptotic activity in the TB group than in the sham and control groups. Conclusion: The present study showed that intracameral TB injection is safe systematically but may be toxic to corneal tissue, as demonstrated using oxidative stress parameters and histopathological evaluation. .

Objetivo: Este estudo experimental tem como objetivo investigar os efeitos do azul de tripan intracameral (TB) sobre parâmetros de estresse oxidativo e apoptose no tecido da córnea. Métodos: Trinta ratos foram divididos aleatoriamente em três grupos de 10 animais cada: grupo simulação (Grupo 1); grupo controle (Grupo 2); e grupo tratamento (Grupo 3). No grupo controle foi administrado 0,01 cc de solução salina balanceada (BSS). No grupo tratamento foi administrado 0,006 mg/0,01 cm de TB. O estado antioxidante total ( TAS) e estado oxidante total ( TOS) no tecido da córnea e sangue foram medidos e o índice de estresse oxidativo (OSI) foi calculado. Finalmente, histopatologia do tecido da córnea foi avaliada por meio da coloração para caspase-3 e -8; atividade apoptótica também foi examinada. Resultados: Os níveis de TAS, TOS e OSI das amostras de sangue não foram significativamente diferentes (p>0,05 para todos). Em comparação com os grupos simulação e controle, os níveis de TOS e OSI no tecido da córnea foram significativamente diferentes no grupo tratamento (p<0,05 para todos). Não houve diferença significativa entre o grupo simulção e o grupo controle (p>0,05). A coloração imuno-histoquímica com a caspase-3 e caspase-8 demonstrou maior atividade apoptótica no grupo tratamento do que nos grupos controle e simulação. Conclusão: Este estudo mostrou que a injeção intracameral TB é segura sistematicamente, mas pode ser tóxica ao tecido da córnea, como demonstrado através de parâmetros de estresse oxidativo e avaliação histopatológica. .